pcr退火温度怎么确定
2025-10-10
计算退火温度的方法： 1.退火温度＝4×（G＋C）＋2×（A＋T）－（5～8）只是粗算,有时不灵,但比较简便. 2.用primer5（oroligo6）计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2or3度最好. 3.合成引物的单子上也有个Tm,减去5～8也可,但有些公司提供的Tm就是方法1计算的. 我认为方法二最准确,不知道还有其他方法吗...
热处理退火、回火、正火、淬火的确切温度分别是多少
2025-10-08
退火；根据材料不同选择500--550度回火；根据材料和用途分为【低回180--240，中回300--360，高回580--660】正火一般采用920--930淬火根据材料不同采用800--860度不同...
退火温度怎么确定
2025-10-06
退火温度确定的计算公式是：4×（G＋C）＋2×（A＋T）－（5～8）。退火温度（AnnealingTemperatre）是指引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度。它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火，同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃...