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pcr扩增的原理和步骤

发布时间：2025-10-12 | 来源：互联网转载和整理

pcr技术的原理和DNA的天然复制过程类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物和DNA的半保留复制。

1、高温进行变性。将模板DNA加热至95℃左右，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链进行DNA解离，令其成为单链，方便它和寡核苷酸引物进行结合。

2、低温进行退火（复性）。将温度控制在55℃左右，将变性后的单链与寡核苷酸引物通过碱基互补配对，再次形成局部双链。

3、中温进行延伸。将温度控制在75℃左右，在TaqDNA酶的作用下，以靶序列作为模板，碱基互补配对作为原则，用dNTP作为其原料，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。