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如何进行pcr引物设计

发布时间：2025-10-06 | 来源：互联网转载和整理

原理：

PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。

原则：

引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。产物不能形成二级结构。引物长度一般在15到30碱基之间。G加C含量在百分之40到60之间。碱基要随机分布。引物自身不能有连续4个碱基的互补。引物之间不能有连续4个碱基的互补。引物5撇端可以修饰。引物3撇端不可修饰。引物3撇端要避开密码子的第3位。